内容发布更新时间 : 2025/6/18 19:51:37星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
生物化学实验讲义
实验一 蛋白质的颜色反应与沉淀反应
蛋白质分子中的某种或某些基团与显色剂作用，可产生特定的颜色反应。不同蛋白质所含的氨基酸不完全相同，颜色反应亦可不同。颜色反应不是蛋白质的专一反应，一些非蛋白物质亦可产生相同的颜色反应，因此不能仅根据颜色反应的结果决定被测物质是否是蛋白质。颜色反应是一些常用的蛋白物质的定量测定的依据。
多数蛋白质是亲水胶体，当其稳定因素被破坏或与某些试剂结合成不溶解的盐后，即产生沉淀。
实验材料与仪器
鸡（或鸭）蛋白
吸管0.5 ml（×1）、1ml（×3）、2 ml（×2）、5ml（×2） 滴管
试管1.5×15cm（×10） 水浴锅 电炉
吸滤瓶500ml（1） 布氏漏斗
试剂
1. 卵清蛋白液：将鸡（或鸭）蛋白用蒸馏水稀释20～40倍，2～3层纱布过滤，滤液冷藏备用。 2. 1%苯酚溶液：苯酚1ml，加蒸馏水稀释至100ml。
3. 1%白明胶液：1g白明胶溶于少量热水，完全溶解后稀释至100ml。
4. 米伦（Millon）试剂：40g汞溶于60ml浓硝酸（比重1.42），水浴加温助溶，溶解后加二倍体积蒸馏水，混匀，静置澄清，取上清液备用。此试剂可长期保存。
5. 0.5%茚三酮溶液：0.5g茚三酮溶于95%乙醇并稀释至100ml。 6. 尿素：如颗粒较粗，最好研成细粉末状。
7. 10%NaOH溶液：10gNaOH溶于蒸馏水，稀释至100ml。 8. 浓硝酸：比重1.42
9. 1%硫酸铜溶液：硫酸铜1g溶于蒸馏水，稀释至100ml。 10. 硫酸铵晶体：如颗粒太大，最好研碎。
11. 饱和硫酸铵溶液：蒸馏水100ml，加硫酸铵至饱和。 12. 95%乙醇 13. 结晶氯化钠
14. 2～3%醋酸铅（或AgNO3）：2～3g醋酸铅溶于蒸馏水并稀释至100ml。 15. 5%鞣酸溶液：5g鞣酸溶于蒸馏水并稀释至100ml 16. 饱和苦味酸溶液
17. 1%醋酸溶液：冰醋酸1ml用蒸馏水稀释至100ml。
主要内容
（一）米伦氏反应
1. 用苯酚实验：取1%苯酚溶液1ml于试管中，加米伦氏剂约0.5ml，小心加热溶液即出现玫瑰红色。
2. 用蛋白溶液实验：取2ml蛋白溶液，加入0.5ml米伦试剂，此时出现蛋白质的沉淀。小心加热，凝固之蛋白质出现红色。
3. 用白明胶（也是一种蛋白）做上述实验，结果如何？ （二）双缩尿反应
1. 取少许结晶尿素放在干燥试管中，微火加热，尿素熔化并形成双缩尿，释出之氨可用红色石蕊试纸检测。至试管内有白色固体出现，停止加热，冷却。然后加10%NaOH溶液1ml摇匀，再
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生物化学实验讲义
加2滴1%CuSO4溶液，混匀，观察有无紫色出现。
2. 另取一只试管，加蛋白液10滴，再加10%NaOH溶液10滴及1%CuSO4溶液2滴，混匀，是否出现紫玫瑰色。
注意硫酸铜不能多加，否则产生深蓝色的干扰络离子。 （三）黄色反应
于一试管内，置蛋白溶液10滴及浓硝酸3～4滴，加热，冷却后再加入10%NaOH溶液5滴，观察颜色变化。 （四）茚三酮反应
取1ml蛋白溶液置于试管中，加2滴茚三酮试剂，加热至沸，即有蓝紫色出现。注意此反应必须在pH5～7进行。 （五）蛋白质盐析作用
1.取蛋白质溶液5ml于试管，再加入等量饱和硫酸铵溶液（此时硫酸铵的浓度为50%饱和），微微摇动试管，使溶液混合后静置数分钟，球蛋白即析出（如无沉淀可再加少许饱和硫酸铵）。
2. 将上述混合溶液过滤，滤液中加入硫酸铵粉末，至不