内容发布更新时间 : 2024/11/8 3:17:26星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。
2、含量与纯度测定
① 凯氏定氮法：经典方法；国标中测定蛋白质含量的方法。首先样品与浓硫酸共热消化，蛋白氮转化为氨与硫酸结合生成硫酸铵。常加硫酸铜（加速分解）、硫酸钾或硫酸钠（提高沸点）、过氧化氢（加速氧化）。然后在凯氏定氮仪中加入强碱放出氨，用硼酸吸收氨。滴定、测定用去的硼酸，计算得出蛋白氮。 ② 紫外吸收法：蛋白质浓度(mg/ml)＝1.55A280－0.75A260，
测定范围：0.1－0.5 mg/ml
③ 双缩脲法：540nm ④ 福林－酚法：
⑤ 考马斯亮蓝G-250染色法：在酸性溶液中为棕红色，与蛋白质结合后变成蓝色，在处比色。 ⑥ 电泳法鉴定纯度 ⑦ 免疫化学法 ⑧ 超离心法 ⑨ 薄层层析法