生物化学复习题1

内容发布更新时间 : 2024/11/2 18:36:23星期一 下面是文章的全部内容请认真阅读。

11.分析下列肽段在pH1.9,pH3.0,pH6.5和pH10.0下进行纸电泳时的移动方向(分别用下列符号表示:不动[O],移向阴极[C],移向阳极 [A])。

(l)Lys-Gly-A1a-G1y(2)Lys-Gly-A1a-G1u(3)His-Gly-Ala-Glu(4)G1u-G1y-Ala-Glu(5)Gln-G1y-Ala-Lys

12.如果上题中五个肽的混合物,在Dowex-1(一种阴离子交换树脂)的离子交换柱上以pH从10到1.0连续变化的缓冲系统作洗脱,试分析每种肽洗脱的相对次序。

13.分别指出下列酶能否水解与其对应排列的肽,如能,则指出其水解部位。
肽 酶
(1)Phe-Arg-Pro 胰蛋白酶
(2)Phe-Met-Leu 羧肽酶B
(3)Ala-Gly-Phe 胰凝乳蛋白酶
(4)Pro-Arg-Met 胰蛋白酶

14.当一种四肽与FDNB反应后,用6mol/LHCl水解得DNP-Va1及三种其它氨基酸。当这种四肽用胰蛋白酶水解时形成二种碎片。其中一种碎片用

还原后再进行水解,水解液中发现有氨基乙醇和一种

与重氮苯磺酸反应生成棕红色的氨基酸。试问在原来的四肽中可能存在哪几种氨基酸,它们的顺序怎样?

15.某一肽经酸水解组成分析为5种氨基酸,该肽的N-末端非常容易环化。经溴化氰处理后得一游离碱性氨基酸,Pauly反应阳性。若用胰蛋白酶作用则得两个肽段:其一为坂口反应阳性,另一个在280nm有强的光吸收,并呈Millon氏阳性反应。求此肽的氨基酸排列顺序,并指出它的等电点应该是大于、等于或小于7?

16.假定有1mmol的五肽,酸水解生成2mmol谷氨酸,1mmol赖氨酸,没有能够定量回收其它氨基酸。将原来的五肽用胰蛋白酶水解成两个肽段,在pH7.0进行电泳,一个肽段移向阳极,另一个则移向阴极。用FDNB处理胰蛋白酶水解的一个肽段,再用酸水解,生成DNP-谷氨酸。用胰凝乳蛋白酶处理原来五肽生成两个肽段及游离谷氨酸。试从上述实验结果写出该五肽的氨基酸顺序。

17.用酸水解一种六肽,定量回收得到甘氨酸及另一种氨基酸。用胰蛋白酶处理该肽生成的产物,在不同的层析和电泳系统中均只有一个单一的斑点,但是迁移率与未经处理的六肽不同。用胰凝乳蛋白酶水解原来的六肽,生成的产物中有一游离氨基酸并具有紫外吸收,试从上述实验结果排出该六肽的氨基酸顺序。

18.某一多肽抗菌素(l)彻底酸水解并随后谁行氨基酸分析知含有等摩尔的Leu、Orn、Phe、Pro和Va1;该肽不被水解;
(2)此肽的相对分子质量大约为1200;
(3)当用羧肽酶处理该肽时,
(4)该肽用2,

4-二硝基氟苯处理,随后完全水解并进行层析仅仅得到游离氨基酸和DNP-δ-Orn:


(5)该

肽部分水解,随后层析分离并进行顺序分析得下列二肽和三肽:Leu-Phe,Phe-Pro,Phe-Pro-Val,

Va1-Orn-Leu,Orn-Leu, Val-Orn,Pro-Val-Orn。根据以上实验结果推出该肽的氨基酸顺序,并说明其理由。

19.根据以下实验结果推断一多肽链的氨基酸顺序。
(1)酸水解和氨基酸组成为Met,Phe,

,Arg,


(2)羧肽酶A水解得一氨基酸为A1a。
(3)胰蛋白酶水解得四个肽段,其氨基酸

,Met,Phe,Ser②A1a,Ser。
(5)嗜热菌蛋白酶水解得两个肽段,

,Met,Phe,Ser。

组成如下:①Ala,Arg②Lys,Phe,Ser③ Lys④A1a,Met,Ser。
(4)溴化氰水解得两个肽段,其氨基酸组成如下:①A1a, Arg,

20.根据以下实验结果排出该肽的氨基酸顺序。
(1)氨乙基化后用胰蛋白酶水解得以下肽段,其氨基酸组成分别如下:①Ala,Arg,Gly,Met,Phe②2(AECys)(AE代表氨乙基)③A1a, AECys,Phe④Asp,,Asp,Arg,,G1y,Lys, Met,Lys,Tyr。
(2)溴化氰裂解得一肽段,其氨基酸组成如下:

,Tyr。
(3)胰凝乳蛋白酶水解得三个肽段,其氨基酸组成分别如下:①Ala,Gly,Lys,Met,Phe②Asp,Cys,Tyr③A1a,Arg,

,Phe。
(4)溴化氰加胰蛋白酶处理后得三个肽段,其氨基酸组成

,Lys,Phe,Tyr③A1a,Arg,Phe。

分别如下:①Gly,Met② Ala,Asp,其氨基酸组成如下:①A1a,Arg,Ser②Ala,

21.一个多肽还原后生成两条肽链,序列如下:
链1:

Ala-Cys-Phe-Pro-Lys-Arg-Trp-Cys-Arg-Arg-Val-Cys
链2:Cys-Tyr-Cys-Phe-Cys用嗜热菌蛋白酶水解二硫键完整的天然肽,得到下列肽段:(1)Ala,Phe试定出此天然肽中二硫键的位置。

22.用下列哪种试剂最适合完成以下工作:溴化氰、尿素、β-巯基乙醇、胰蛋白酶、过甲酸、丹磺酰氯(DNS-Cl)、6mol/L盐酸、茚三酮、苯异硫氰酸(异硫氰酸苯酯)、胰凝乳蛋白酶。
(1)测定一段小肽的氨基酸排列顺序
(2)鉴定小于

克肽的N-端氨基酸
(3)使没有二硫键的蛋白质可逆变性。如有二硫

,Val(2)Arg,Lys,Phe,Pro(3)

,Trp,Tyr(4)

键,应加何种试剂?
(4)水解由芳香族氨基酸羧基形成的肽键
(5)水解由甲硫氨酸羧基形成的肽键
(6)水解由碱性氨基酸羧基形成的肽键

23.有一球状蛋白质,在pH7的水溶液中能折叠成一定的空间结构。通常非极性氨基酸侧链位于分子内部形成疏水核,极性氨基酸侧链位于分子外部形成亲水面。
问(1)Val、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile和His中哪些氨基酸侧链位于分子内部?哪些氨基酸侧链位于分子外部?
(2)为什么球状蛋白质分子内部和外部都可发现Gly和A1a?
(3)虽然Ser、Thr、Asn和Gln是极性的,为什么它们位于球状蛋白质的分子内部?
(4)在球状蛋白质分子的内部还是外部能找到Cys(半胱氨酸),为什么?

24.血红蛋白(Hb)是由两个α亚基和两个β-亚基组成的四聚体,它的α-和β-亚基的结构很类似于肌红蛋白(Mb)。但是Mb中许多亲水残基在Hb中却被疏水残基取代。
问(1)这种现象怎样与疏水残基折叠到分子内部的原则相-致?
(2)在维持Hb四级结构的作用力方面,你能得出什么结论?

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