实验一
甘草中总皂苷的提取、分离与含量测定
一、实验目çš?/p>
1
.熟练进行甘草中总皂苷的提取和精制方法ã€?/p>
2
.能够用化学法和色谱法检识甘草中的皂苷类物质ã€?/p>
二、实验原ç�?/p>
甘草酸和甘草次酸均为含有羧基的酸性三萜皂苷,
甘草酸酸性较强,
在植ç‰?/p>
中与钾成盐而溶于水ï¼?/p>
易溶于热水ã€?/p>
而甘草酸在冷水中的溶解度较小ï¼?/p>
所以我ä»?/p>
可用水提取甘草酸的钾盐,再加稀酸,放冷,使甘草酸游离沉淀析出。也可以ç”?/p>
乙醇提取后,
乙酸乙酯萃取除去甘草中的黄酮类化合物ï¼?/p>
然后利用大孔吸附树脂
的吸附作用,对甘草总皂苷进行富集,再利用硅胶进行柱层析分离ã€?/p>
三、主要仪器及耗材
仪器ï¼?/p>
水浴锅、旋转蒸发仪、循环水真空泵、三用紫外仪ã€?/p>
原料与试剂:甘草粗粉、乙醇、乙酸乙酯ã€?/p>
D101
大孔吸附树脂(或
AB-8
大孔树脂)、色谱用硅胶、氯仿、丙酮、硅胶薄层板ã€?/p>
四、实验内容与步骤
1
.甘草总皂苷的提取
ï¼?/p>
1
)水提法:取甘草粗粉
20
克,加水煎煮提取
2
ï½?/p>
3
次,滤过得水提液ï¼?/p>
静置,取上清液,浓缩得甘草浸膏(含甘草酸
>20%
ï¼?/p>
。浸膏加
3
倍量水溶解,åŠ?/p>
硫酸酸化,放置,滤过得甘草酸粗品ã€?/p>
ï¼?/p>
2
ï¼?/p>
醇提法:
取甘草粗ç²?/p>
20g
ï¼?/p>
150mL60%
乙醇溶液äº?/p>
70
â„?/p>
下回流提å�?/p>
1.5h
ï¼?/p>
抽滤制得甘草提取液,放置待用ã€?/p>
2
.甘草总皂苷的富集
甘草提取液减压浓缩至
50mL
左右ï¼?/p>
等体积的乙酸乙酯萃取
2
次,
除去黄酮
类化合物。萃取后的水相减压浓缩除去残留的乙酸乙酯后上大孔吸附树脂ã€?/p>
以下两种大孔吸附树脂任选一种即可ã€?/p>
D101
型大孔吸附树脂:
称取
20~25
å…?/p>
D101
型大孔吸附树è„?/p>
(或è€?/p>
30gAB-8
型大孔吸附树脂)
,预处理后装柱,甘草总皂苷的粗提液过
D101
型大孔吸附树